முதலில், டிரில் பிட்டைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கு முன், துருப்பிடிக்காத சிரமங்களைப் பாருங்கள்எஃகு விளிம்புசெயலாக்கம். துரப்பணத்தின் பயன்பாட்டைக் கண்டறிய, சிரமம் மிகவும் துல்லியமானது, மிக வேகமாக இருக்கும் என்பதைக் கண்டறியவும். துருப்பிடிக்காத எஃகு ஃபிளேன்ஜ் செயலாக்கத்தில் உள்ள சிரமங்கள் என்ன? ஒட்டும் கத்தி: துருப்பிடிக்காத எஃகு செயலாக்க சிப் கடினத்தன்மை, வெட்டு வெப்பநிலை மிகவும் அதிகமாக உள்ளது. முன் கட்டர் மேற்பரப்பு வழியாக வலுவான சிப் பாயும் போது, ​​அது பிசின், இணைவு வெல்டிங் மற்றும் பிற பிசின் நிகழ்வு ஏற்படும், இது பதப்படுத்தப்பட்ட பாகங்களின் தோற்றத்தை பிரகாசத்தை பாதிக்கிறது; வேலை கடினப்படுத்துதல் கடுமையானது.

நுகர்வில்பெரிய விளிம்புகள், பாதிக்கும் பல செயல்பாட்டு கூறுகள் உள்ளனபெரிய விளிம்புகள். இங்கே நாம் பல பொதுவான கூறுகளைப் பற்றி பேசுகிறோம். முதலாவது அனீலிங் வெப்பநிலை (அனீலிங் வெப்பநிலை என்பது முறையே ப்ரைமர் மற்றும் டெம்ப்ளேட்டின் வெப்பநிலை அளவுரு ஆகும், ப்ரைமர் மற்றும் நிரப்பு வரிசையின் 50% இரட்டை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏ மூலக்கூறுகளின் வெப்பநிலையாக இருக்கும் போது.

இது PCR இன் தனித்துவத்தை பாதிக்கும் ஒரு முக்கிய காரணியாகும். அபிலாஷையின் விஷயத்தில், ப்ரைமர் இலக்கு வரிசையுடன் சிதைக்கப்படுவதை உறுதிசெய்யும் அளவுக்கு அனீலிங் வெப்பநிலை குறைவாகவும், குறிப்பிடப்படாத பிரிப்புகளைக் குறைக்கும் அளவுக்கு அதிகமாகவும் இருக்கும். நியாயமான அனீலிங் வெப்பநிலை 55℃ முதல் 70℃ வரை இருக்கும். அனீலிங் வெப்பநிலை பொதுவாக ப்ரைமரின் Tm ஐ விட 5℃ குறைவாக அமைக்கப்படுகிறது.