ပထမ ဦး စွာ, လေ့ကျင့်ခန်းနည်းနည်းရွေးချယ်ခြင်းမပြုမီ, သံမဏိအတွက်အခက်အခဲများကိုကြည့်ပါသံမဏိမျက်နှာပြင်အပြောင်းအလဲနဲ့။ စစ်ရေးလေ့ကျင့်မှု၏အသုံးပြုမှုကိုရှာဖွေရန်အလွန်တိကျမှုသည်အလွန်တိကျမှုရှိနိုင်အောင်အခက်အခဲများကိုရှာဖွေပါ။ သံမဏိမျက်နှာပြင်တွင်အခက်အခဲများကဘာလဲ။ စေးကပ်ဓား ခိုင်ခံ့သောချစ်ပ်သည်ရှေ့ရှုးမျက်နှာပြင်မှတစ်ဆင့်စီးဆင်းလာသောအခါ၎င်းသည်ကော်နှင့်ပေါင်းစပ်ထားသောလိမ္မာပါးနပ်မှုနှင့်အခြားကော်ဖြစ်စဉ်များကိုဖြစ်ပေါ်စေသည်။ ကြိုးစားအားထုတ်မှုပြင်းထန်သည်။

၏စားသုံးမှု၌တည်၏ကြီးမားသောအနားကွပ်, အကျိုးသက်ရောက်သောအလုပ်လုပ်တဲ့ element တွေအများကြီးရှိပါတယ်ကြီးမားသောအနားကွပ်။ ဤတွင်ကျွန်ုပ်တို့သည်အများသုံးဒြပ်စင်များအကြောင်းပြောကြသည်။ ပထမတစ်ခုမှာ neale nealing အပူချိန် (ဆန်းကြယ်သောအပူချိန်သည်အပူချိန်၏အပူချိန် Parameter ၏အပူချိန် Parameter ဖြစ်သည်။

၎င်းသည် PCR ၏တိကျသောအရေးပါသောအရေးကြီးသောအချက်တစ်ချက်ဖြစ်သည်။ Aspiration ဖြစ်စဉ်တွင်, annealing အပူချိန်သည် primer ကို target sequence ကိုဖွင့်ရန်နှင့် nononpecific ခွဲများကိုလျှော့ချရန်လုံလောက်သောမြင့်မားစေရန်လုံလောက်သည်။ ကျိုးကြောင်းဆီလျော်သော annealing အပူချိန် 55 ℃မှ 70 ℃အထိ။ AnnEning အပူချိန်ကိုယေဘုယျအားဖြင့် 5 ℃ primer ၏ TM ထက်နိမ့်သတ်မှတ်ထားသည်။