ပထမ ဦး စွာလေ့ကျင့်ခန်း၏ရွေးချယ်ရေးမတိုင်မီ, သံမဏိကြည့်ရှုပါသံမဏိမျက်နှာပြင်အပြောင်းအလဲနဲ့အပြောင်းအလဲနဲ့ဘာလဲ လေ့ကျင့်ခန်းကို အသုံးပြု. အလွန်တိကျမှုသည်အလွန်တိကျမှန်ကန်မှုရှိနိုင်သည်ကိုရှာဖွေပါ။ အတွက်အခက်အခဲများကဘာလဲသံမဏိမျက်နှာပြင်ပြုပြင်ခြင်း တိုတောင်းသောတုတ်ဓား - သံမဏိထုတ်ခြင်းခံရသောချစ်ပ်သည်ခိုင်ခံ့သောသံမဏိပြုပြင်ခြင်းခံရသောချစ်ပ်သည်ပြင်းထန်ပြီးခက်ခဲသောအပူချိန်အလွန်မြင့်မားသည်။ ခိုင်မာသောချစ်ပ်သည်ရှေ့ဓါးမျက်နှာပြင်မှတစ်ဆင့်စီးနင်းလိုက်ပါက, ကြိုးစားအားထုတ်မှုပြင်းထန်သည်။

၏စားသုံးမှု၌တည်၏ကြီးမားသောအနားကွပ်, ၏ function ကိုထိခိုက်တဲ့အချက်များစွာရှိပါတယ်ကြီးမားသောအနားကွပ်အောက်ပါအချက်များအရကျွန်ုပ်တို့သည်များသောအားဖြင့်အချက်များအနည်းငယ်ကိုပြောသောအချက်များမှာပထမဖြစ်ပြီးပထမအကြိမ်တွင်အပူချိန် (အဆောသောအပူချိန်) သည်အပူချိန်နှင့် template ၏အပူချိန်ဖြစ်သည်။
၎င်းသည် PCR ၏တိကျသောအရေးပါမှုကိုပိုမိုထိခိုက်စေသည့် ပို. အရေးကြီးသောအချက်တစ်ချက်ဖြစ်သည်။ ရည်မှန်းချက်အဖြစ်ရေးတွင် Annealing အပူချိန်သည် primer သည် target sequence ကိုလျှော့ချရန်အတွက်အသုံး 0 င်ရန်လုံလောက်သည်။ 55 မှ 70 အထိကျိုးကြောင်းဆီလျော်သောဆန်းချက်အပူချိန်ကိုယေဘုယျအားဖြင့် Primer ၏ TM ထက် 5 နှစ်နိမ့်သတ်မှတ်ထားသည်။