ກ່ອນອື່ນ ໝົດ, ກ່ອນທີ່ຈະເລືອກເຄື່ອງເຈາະ, ໃຫ້ເບິ່ງຄວາມຫຍຸ້ງຍາກໃນສະແຕນເລດແຜ່ນເຫຼັກການປຸງແຕ່ງ. ຊອກຫາຄວາມຫຍຸ້ງຍາກສາມາດຖືກຕ້ອງຫຼາຍ, ໄວຫຼາຍເພື່ອຊອກຫາການນໍາໃຊ້ເຈາະໄດ້. ຄວາມຫຍຸ້ງຍາກໃນການປຸງແຕ່ງແຜ່ນເຫຼັກສະແຕນເລດແມ່ນຫຍັງ? ມີດຫນຽວ: ຄວາມທົນທານຂອງຊິບປະມວນຜົນສະແຕນເລດ, ອຸນຫະພູມການຕັດແມ່ນສູງຫຼາຍ. ໃນເວລາທີ່ chip ທີ່ເຂັ້ມແຂງໄຫຼຜ່ານຫນ້າດິນ cutter, ມັນຈະເກີດຂຶ້ນກາວ, ການເຊື່ອມໂລຫະ fusion ແລະປະກົດການກາວອື່ນໆ, ເຊິ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຄວາມສະຫວ່າງຮູບລັກສະນະຂອງພາກສ່ວນປຸງແຕ່ງ; ການເຮັດວຽກແຂງແມ່ນຮ້າຍແຮງ.

ໃນ​ການ​ບໍ​ລິ​ໂພກ​ຂອງ​flanges ຂະຫນາດໃຫຍ່, ມີອົງປະກອບທີ່ເປັນປະໂຫຍດຫຼາຍທີ່ມີຜົນກະທົບflanges ຂະຫນາດໃຫຍ່. ໃນທີ່ນີ້ພວກເຮົາສົນທະນາກ່ຽວກັບອົງປະກອບທົ່ວໄປຈໍານວນຫນຶ່ງ. ທໍາອິດແມ່ນອຸນຫະພູມ annealing (ອຸນຫະພູມ annealing ແມ່ນຕົວກໍານົດການອຸນຫະພູມຂອງ primer ແລະ template ຕາມລໍາດັບ, ໃນເວລາທີ່ 50% ຂອງ primer ແລະລໍາດັບປະກອບແມ່ນອຸນຫະພູມຂອງໂມເລກຸນ DNA ຄູ່.

ມັນເປັນປັດໃຈສໍາຄັນທີ່ມີຜົນກະທົບຕໍ່ຄວາມສະເພາະຂອງ PCR. ໃນກໍລະນີຂອງການປາດຖະຫນາ, ອຸນຫະພູມ annealing ຕ່ໍາພຽງພໍທີ່ຈະຮັບປະກັນວ່າ primer ໄດ້ຖືກ deffired ກັບລໍາດັບເປົ້າຫມາຍ, ແລະສູງພຽງພໍທີ່ຈະຫຼຸດຜ່ອນການແຍກຕ່າງຫາກ nonspecific. ອຸນ​ຫະ​ພູມ​ທີ່​ສົມ​ເຫດ​ສົມ​ຜົນ annealing ຈາກ 55 ℃​ກັບ 70 ℃​. ອຸນ​ຫະ​ພູມ annealing ໄດ້​ຖືກ​ກໍາ​ນົດ​ໂດຍ​ທົ່ວ​ໄປ​ທີ່ 5 ℃​ຕ​່​ໍ​າ​ກ​່​ວາ Tm ຂອງ primer​.