ກ່ອນອື່ນ ໝົດ, ກ່ອນທີ່ຈະເລືອກເຈາະ, ຈົ່ງເບິ່ງສະແຕນເລດແຜ່ນເຫຼັກການປຸງແຕ່ງມີຄວາມຫຍຸ້ງຍາກແມ່ນຫຍັງ? ຊອກ​ຫາ​ຄວາມ​ຫຍຸ້ງ​ຍາກ​ສາ​ມາດ​ຖືກ​ຕ້ອງ​ຫຼາຍ​, ໄວ​ຫຼາຍ​ເພື່ອ​ຊອກ​ຫາ​ການ​ນໍາ​ໃຊ້​ຂອງ​ເຈາະ​ໄດ້​. ສິ່ງ​ທີ່​ມີ​ຄວາມ​ຫຍຸ້ງ​ຍາກ​ໃນສະແຕນເລດ flangeການປຸງແຕ່ງ? ມີດໄມ້ສັ້ນໆ: ຊິບປະມວນຜົນສະແຕນເລດທີ່ເຂັ້ມແຂງແລະທົນທານ, ອຸນຫະພູມການຕັດແມ່ນສູງຫຼາຍ. ໃນເວລາທີ່ chip ທີ່ເຂັ້ມແຂງໄຫຼຜ່ານຫນ້າດິນມີດ, ຈະທໍາຮ້າຍການຜູກມັດ, ການເຊື່ອມໂລຫະ fusion ແລະປະກົດການຕິດອື່ນໆ, ຜົນກະທົບຕໍ່ຄວາມສະຫວ່າງດ້ານຂອງພາກສ່ວນປະມວນຜົນ; ການເຮັດວຽກແຂງແມ່ນຮ້າຍແຮງ.

ໃນການບໍລິໂພກຂອງflanges ຂະຫນາດໃຫຍ່, ມີຫຼາຍປັດໃຈທີ່ມີຜົນກະທົບການທໍາງານຂອງflanges ຂະຫນາດໃຫຍ່, ຕໍ່ໄປນີ້ພວກເຮົາເວົ້າວ່າປັດໃຈທົ່ວໄປຈໍານວນຫນຶ່ງ, ທໍາອິດແມ່ນອຸນຫະພູມ annealing (ອຸນຫະພູມ annealing ແມ່ນຕົວກໍານົດການອຸນຫະພູມຂອງ primer ແລະ template ຕາມລໍາດັບ, ໃນເວລາທີ່ 50 ສ່ວນຮ້ອຍຂອງ primer ແລະລໍາດັບເສີມແມ່ນອຸນຫະພູມຂອງໂມເລກຸນ DNA ສອງສາຍ.
ມັນເປັນປັດໃຈສໍາຄັນກວ່າທີ່ມີຜົນກະທົບຕໍ່ຄວາມສະເພາະຂອງ PCR. ໃນກໍລະນີຂອງຄວາມທະເຍີທະຍານ, ອຸນຫະພູມ annealing ແມ່ນຕ່ໍາພຽງພໍທີ່ຈະຮັບປະກັນວ່າ primer ເປັນປະໂຫຍດສໍາລັບການ quenching ກັບລໍາດັບເປົ້າຫມາຍ, ແລະສູງພຽງພໍຮ່ວມກັນເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນຄວາມບໍ່ສະເພາະ, ຕາມລໍາດັບ. ອຸນຫະພູມ annealing ທີ່ສົມເຫດສົມຜົນຈາກ 55 ຫາ 70 ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນຖືກກໍານົດເປັນ 5 ຕ່ໍາກວ່າ Tm ຂອງ primer.