Brida handien ekoizpenean, brida handien errendimenduan eragiten duten faktore asko daude. Jarraian, hainbat faktore komun esaten ditugu, lehena annealing-tenperatura da (annealing-tenperatura tenperatura-parametroa da lehengaia eta txantiloia konbinatzen direnean, abiarazteen % 50 denean Sekuentzia osagarria bikoitz gisa adierazten den tenperatura). kateatutako DNA molekula PCRren espezifikotasunari eragiten dion faktore garrantzitsu bat da. Baldintza idealetan, abiarazte-tenperatura nahikoa baxua da, abiarazleak nahi den sekuentziara modu eraginkorrean errekodatzen direla ziurtatzeko. Lotura ez-espezifikoa murrizteko nahikoa altua izatea. Errekuzimenduaren tenperatura arrazoizkoa 55 º C-tik 70 º C-ra da. Errekuzitzeko tenperatura, oro har, primeraren Tm baino 5 º C baxuagoa da.
Zehaztutako tenperaturara iristen den. Erretiro-tenperatura behar den tenperaturara iristen da. Eskala handiko brida-tratamendua, oro har, soluzio solidoen tratamendu termikoaren bidez egiten da, normalean "errezitoa" deitzen dena, eta tenperatura-tartea 1040 ~ 1120 °C (japoniar estandarra) da. Ere egin dezakezu behaketa labearen behaketa-zulotik. Erretiro-eremuko brida-bilgailu handiek goritasun egoeran egon behar dute, baina ez dago leuntzerik eta saggingrik.
Jarraian, labearen gorputzaren zigilatzea (kanpoko zorroa altzairuzko plakarekin eta sekzioko altzairuarekin soldatzen da, orga altzairuarekin eta altzairuzko plakarekin soldatzen da, orgak kontaktu leuna pasatzen du labearen estaldurarekin eta harea zigilatzeko mekanismoa bero-erradiazioa murrizteko. eta konbekzio-galera, eta labearen gorputzaren zigilatzea modu eraginkorrean bermatu behar da, errekostatzeko labe distiratsua kanpoko airetik itxi eta isolatu behar da. hidrogenoa gas babesle gisa erabiliz, ihes-ataka bakarra dago irekita (isuritako hidrogenoa pizteko erabiltzen da). Ikuskapen-metodoa errezistatzeko labearen junturak xaboi-urarekin aplika daitezke gasa martxan dagoen ikusteko. Gasa ibiltzeko lekurik errazena errekuzitzeko labea hodian sartzen den tokia eta hodia isurtzen den tokia da. Leku honetan zigilatzeko eraztunak bereziki higatzeko joera du. Beti egiaztatu maiz aldatzeko.
Bigarrenik, babes-gasaren presioa, mikro-ihesak gerta ez daitezen, labearen babes-gasak presio positibo jakin bat mantendu behar du, hidrogenoaren babes-gasa bada, oro har 20 kBar baino gehiago behar du. Anealing atmosfera: Orokorrean, hidrogeno purua erabiltzen da annealing atmosfera gisa, eta atmosferaren purutasuna hobe da %99,99 edo gehiago. Atmosferaren beste zati bat gas geldoa bada, purutasuna txikiagoa izan daiteke, baina ez du oxigeno edo ur-lurrun gehiegi eduki behar.
Argitalpenaren ordua: 2019-07-31