Suurte äärikute tootmisel on suurte äärikute jõudlust mõjutavaid tegureid palju. Allpool räägime mitmest ühisest tegurist, millest esimene on anniilimistemperatuur (anniilimistemperatuur on temperatuuri parameeter, kui praimer ja matriits on kombineeritud, kui 50% praimeritest on Temperatuur, mille juures komplementaarne järjestus väljendub topelt- ahelaga DNA molekul on oluline tegur, mis mõjutab PCR spetsiifilisust. Ideaalsetes tingimustes on anniilimise temperatuur piisavalt madal, et tagada praimerite tõhus anniilimine soovitud järjestusega, samas kui see on piisavalt kõrge, et vähendada mittespetsiifilist seondumist temperatuur on 55 ° C kuni 70 ° C. Lõõmutamistemperatuur on üldiselt seatud 5 ° C madalamaks kui praimeri Tm.

Kas määratud temperatuur on saavutatud. Lõõmutustemperatuur saavutab vajaliku temperatuuri. Suuremahuline ääriku töötlemine toimub tavaliselt tahke lahusega kuumtöötlusega, mida tavaliselt nimetatakse "lõõmutamiseks" ja temperatuurivahemik on 1040–1120 °C (Jaapani standard). Vaadelda saab ka läbi lõõmutusahju vaatlusava. Suured äärikuliitmikud lõõmutamistsoonis peaksid olema hõõguvas olekus, kuid pehmenemist ja longust ei toimu.

Järgneb ahju korpuse tihendamine (välimine kest on keevitatud terasplaadi ja sektsiooni terasega, käru keevitatakse terasest ja terasplaadist, käru läbib pehme kontakti ahju vooderdusega ja liivatihendusmehhanismiga, et vähendada soojuskiirgust ja konvektsioonikadu ning tõhusalt tagama ahju korpuse tihendamise), peaks särav lõõmutamisahi olema suletud ja välisõhust isoleeritud. kasutades kaitsegaasina vesinikku, on avatud ainult üks väljalaskeava (kasutatakse välja lastud vesiniku süütamiseks). Kontrollimeetodit saab rakendada seebiveega lõõmutusahju ühenduskohtade vahedele, et näha, kas gaas töötab. Gaasi juhtimiseks on kõige lihtsam koht, kus lõõmutusahi torusse siseneb ja toru tühjendamise koht. Selles kohas olev tihendusrõngas on eriti kulumisohtlik. Kontrollige alati sageli, et muuta.

Teiseks, kaitsegaasi rõhk, et vältida mikrolekke esinemist, peaks ahju kaitsegaas säilitama teatud positiivse rõhu, kui see on vesiniku kaitsegaas, vajab üldiselt rohkem kui 20 kBar. Lõõmutamisatmosfäär: üldiselt kasutatakse lõõmutamise atmosfäärina puhast vesinikku ja atmosfääri puhtus on eelistatavalt 99,99% või rohkem. Kui teine ​​osa atmosfäärist on inertgaas, võib puhtus olla madalam, kuid see ei tohi sisaldada liiga palju hapnikku ega veeauru.